三相分离甾短杆菌胆固醇氧化酶及其性质

• 作者: 梁爽 王武 王龙刚
• 来源期刊: 华东理工大学学报（自然科学版）
• 学科: 工学
• 关键词: 甾短杆菌 胆固醇氧化酶 分离纯化 三相分离 酶学性质
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 页码范围: 190-194,210
• 页数: 6页
• 分类号: TQ920
• 字数: 4116字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-3080.2007.02.010

摘要

三相分离(TPP)是将硫酸铵与叔丁醇混合后形成有机相、中间沉淀相和水相.在20℃,调节发酵上清液的pH至6.0,加入硫酸铵使终浓度为400 g/L,溶解后加入与上清液等体积的叔丁醇,静置1 h分相,胆固醇氧化酶在有机相和水相之间形成蛋白沉淀,12 000 r/min离心10 min收集中间蛋白相,用pH 7.5,10 mmol/L的磷酸缓冲液溶解.结果表明:利用三相分离技术从乳化体系中分离纯化胆固醇氧化酶,比酶活提高了3.49倍,收率达93%.回收的酶液进一步经过DEAE-Sepharose Fast Flow纯化,比酶活从3.56 U/mg提高到30.15U/mg.该酶最适反应温度为60℃,最适反应pH为7.5,酶的等电点为8.5,该酶在37℃,pH 6.0～8.0较为稳定.Hg2+和Ag+离子完全抑制胆固醇氧化酶的活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王武	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	124	898	16.0	22.0
2	王龙刚	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	13	180	9.0	13.0
3	梁爽	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	2	11	1.0	2.0