小鼠层粘连蛋白α5链LG1-3组件的原核表达及多克隆抗体制备

• 作者: 刘昌 刘纯杰 展德文 张兆山 张玉静 袁盛凌
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 小鼠 层粘连蛋白α5链 LG1-3 表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 233-235
• 页数: 3页
• 分类号: Q786|Q785
• 字数: 3476字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2007.02.017

摘要

目的:用原核表达的方法获得带有6个His标记的小鼠层粘连蛋白α5链LG1-3组件的重组蛋白,并制备其多克隆抗体.方法:利用RT-PCR技术,从小鼠心肌组织中扩增出小鼠层粘连蛋白α5链LG1-3组件cDNA片段,将该片段与原核表达载体pET-28a连接,构建重组表达质粒pETLG1-3并转化大肠杆菌BL21(DE3)获得重组表达菌株.用IPTG诱导重组大肠杆菌BL21(DE3)/pETLG1-3表达,SDS-PAGE分析表明在相对分子质量60 000处有特异性重组蛋白表达条带,并经Western印迹进一步鉴定.用含融合蛋白的聚丙烯酰胺凝胶颗粒免疫家兔,制备抗小鼠层粘连蛋白α5链LG1-3组件多克隆抗体,ELISA方法检测抗体滴度.结果:从小鼠心肌组织中克隆了层粘连蛋白α5链LG3组件的基因,并在大肠杆菌得以表达和纯化;制备了重组蛋白的多克隆抗体,其滴度可达到1:10 240.结论:小鼠层粘连蛋白α5链LG1-3组件重组蛋白及其多克隆抗体的获得,为后续研究其功能打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	展德文	军事医学科学院生物工程研究所	10	40	4.0	6.0
2	张兆山	军事医学科学院生物工程研究所	83	560	14.0	19.0
3	刘纯杰	军事医学科学院生物工程研究所	32	160	7.0	11.0
4	袁盛凌	军事医学科学院生物工程研究所	12	68	5.0	8.0