小鼠CDK4基因RNAi慢病毒载体的构建及体外研究

• 作者: 卜碧涛 张旻 张苏明 王雪贞 降风
• 来源期刊: 神经损伤与功能重建
• 学科: 医学
• 关键词: CDK4 神经系统变性疾病 RNA干扰 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 371-373,392
• 页数: 4页
• 分类号: R741|R741.02
• 字数: 2554字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/sjsscj.2008.06.001

摘要

目的:探讨CDK4在神经系统变性疾病中的作用,并构建携带小鼠CDK4-siRNA的慢病毒载体进行体外研究. 方法:设计3个CDK4-siRNA序列和1个无关对照序列,化学合成后退火形成双链,克隆到酶切的pSIH1-H1-copGFP siRNA载体.重组质粒经PCR和测序鉴定后,脂质体介导下转染BV-2细胞,Western blot检测CDK4的表达,筛选出干扰效果最佳的pSIH1-siRNA2.将对照序列和pSIH-siRNA2分别与慢病毒包装质粒共转染293T细胞生成病毒,收集病毒上清并浓缩,测定浓度. 结果:慢病毒感染BV-2细胞后可表达GFP,RT-PCR和Western blot检测CDK4的表达明显下降. 结论:成功构建携带CDK4-siRNA的慢病毒载体,体外研究显示其能明显下调CDK4的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张苏明	华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科	315	1877	20.0	27.0
2	张旻	华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科	44	219	8.0	13.0
3	卜碧涛	华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科	84	412	10.0	15.0
4	王雪贞	华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科	25	86	5.0	8.0
5	降风	华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科	2	2	1.0	1.0