HIV-1 Vif基因的克隆与原核表达

• 作者: 于湘晖 孔维 朱可彤 杜娟 王小丹 郭博
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 人类免疫缺陷病毒1型 病毒感染性因子 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 457-459
• 页数: 3页
• 分类号: Q786
• 字数: 2290字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2008.06.003

摘要

目的 克隆HIV-1 Vif基因编码区序列,并在原核细胞中表达.方法 构建原核表达载体pMRI,将Vif基因序列克隆至该载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,菌体裂解后获得特异性表达蛋白,用组氨酸标签特异性亲和树脂分离纯化该蛋白,并经SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果 表达质粒pMRI-Vif经双酶切,可见约600 bp的Vif基因片段,测序结果 证明质粒构建正确.在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达了可溶性Vif蛋白,纯化后经凝胶自动扫捕分析,纯度达85%以上,蛋白浓度约为1 g/L.纯化产物具有良好的抗原特异性.结论 在大肠杆菌中高效表达了可溶性Vif蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜娟	吉林大学生命科学学院疫苗研究中心	38	176	7.0	12.0
2	孔维	吉林大学生命科学学院疫苗研究中心	51	126	6.0	8.0
3	于湘晖	吉林大学生命科学学院疫苗研究中心	35	51	3.0	5.0
4	郭博	吉林大学生命科学学院疫苗研究中心	7	11	2.0	3.0
5	朱可彤	吉林大学生命科学学院疫苗研究中心	2	0	0.0	0.0
6	王小丹	吉林大学生命科学学院疫苗研究中心	3	4	1.0	2.0