幽门螺杆菌HpaA重组蛋白的表达及免疫效果检测

• 作者: 周侠 夏丽君 张任飞 杨致邦 栗俊杰
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 HpaA蛋白 表达 免疫效果
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 493-496
• 页数: 4页
• 分类号: Q782|R392-33
• 字数: 2946字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2008.06.013

摘要

目的 表达幽门螺杆菌hpaA基因的重组蛋白,并检测其抗原性和免疫原性.方法 用PCR方法 从H. pylriDNA中扩增hpaA基因片段,插入原核表达载体pQE-30,转化大肠杆菌DH5α,进行诱导表达,SDS-PAGE分析表达蛋白的相对分子质量和表达形式,Ni2+-NTA树脂纯化后,用Western blot鉴定其反应原性.用重组蛋白免疫家兔,检测其免疫原性.用重组蛋白免疫小鼠.分别检测胃黏膜、PP细胞悬液及小肠黏液中的IgG和sIgA的含量.结果 重组表达质粒pQE30-hpaA构建正确,所得序列完整,插入的基因片段全长783 bp,与基因文库中的hpaA基因同源性达97.3%.表达产物相对分子质量为30 000,目的 蛋白表达量占全菌总量的31.67%,主要存在于碎菌后上清中,纯度在90%以上.Western blot显示该蛋白可与病人血清特异性结合,免疫血清能与重组蛋白反应,双扩散效价为1:16.小鼠体内IgG、IgA、sIgA含量明显高于PBS对照组.结论 已获得高纯度的HpaA重组蛋白,该蛋白具有良好的抗原性和免疫原性,可用于研制幽门螺杆菌疫苗.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨致邦	重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室	119	522	12.0	17.0
2	栗俊杰	重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室	4	3	1.0	1.0
3	张任飞	重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室	6	17	2.0	3.0
4	周侠	重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室	3	4	2.0	2.0
5	夏丽君	重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室	5	16	2.0	4.0