人组织因子RNAi慢病毒载体的构建与鉴定

• 作者: 包杰 曾方银 熊石龙 王前 裘宇容 郑磊
• 来源期刊: 检验医学
• 学科: 医学
• 关键词: 组织因子 RNAi 慢病毒载体 滴度
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 分子生物学检验论著
• 页码范围: 187-190
• 页数: 4页
• 分类号: R392.7
• 字数: 2954字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2008.02.008

摘要

目的 通过构建携带人组织因子基因的RNAi慢病毒载体,获得可供转染的滴度,为下一步研究该基冈缺陷在真核细胞中的影响提供物质基础.方法 根据人组织因子基因设计的2条互补的单链寡核苷酸退火后形成双链,插入到pENTRTM/U6载体的粘性末端,生成含RNAi盒的pENTR/U6载体,测序;与目标载体pLenti6/BLOCK-iTTM-DEST vector进行位点特异性重组,再测序;经脂质体导入293FT细胞,包装成慢病毒,收集病毒上清并采用系列稀释法测定病毒滴度.结果 经测序分析证实pENTTM/U6-TF-shRNA为阳性克隆,与载体pLenti6,/BLOCK-iTTM-DEST vector重组后测序结果显示也为阳性克隆,包装病毒,病毒悬液的滴度为5×105 TU/mL.结论 成功构建了携带人组织因子(TF)基因的RNAi慢病毒载体,为血栓栓塞性疾病的防治提供了新的思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王前	南方医科大学南方医院检验医学中心	261	1480	18.0	23.0
2	裘宇容	南方医科大学南方医院检验医学中心	149	810	14.0	16.0
3	曾方银	南方医科大学南方医院检验医学中心	69	331	9.0	13.0
4	包杰	南方医科大学南方医院检验医学中心	49	265	9.0	12.0
5	熊石龙	南方医科大学南方医院检验医学中心	42	209	9.0	12.0
6	郑磊	南方医科大学南方医院检验医学中心	192	1001	14.0	18.0