人OCTN2基因片段的克隆及其GST融合蛋白的原核表达

• 作者: 刘玉林 平萍 张伟 朱晓斌 李铮 王益鑫 胡双纲 郑敏 龚东明
• 来源期刊: 中国男科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 有机阳离子转运蛋白质类 重组蛋白质类 附睾 肉碱
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 13-16
• 页数: 4页
• 分类号: R339.21
• 字数: 2329字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0848.2009.05.004

摘要

目的 从人附睾组织中克隆OCTN2基因,构建PGEX-2T-OCTN2载体,原核表达人OCTN2重组蛋白.方法 应用RT-PCR方法从人附睾组织中克隆OCTN2,利用ECoR Ⅰ和BamH Ⅰ酶切位点把OCTN2克隆到PGEX-2T载体,酶切和测序鉴定后,大量诱导重组蛋白并回收.结果 从人附睾组织中克隆到人OCTN2的基因片段,构建了PGEX-2T-OCTN2载体,表达了预期相对分子质量的融合蛋白并大量回收.结论 成功克隆OCTN2,表达并大量回收其融合蛋白,为制备人OCTN2特异性抗体、进一步研究附睾肉碱转运机制奠定了前期基础.