聚乙烯醇脱氢酶的提取及检测

• 作者: 堵国成 廖鲜艳 李敏 陈坚
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 工学
• 关键词: 脱氢酶 提取 检测 聚乙烯醇 表面活性剂
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 35-39
• 页数: 5页
• 分类号: TQ92
• 字数: 2529字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1762-3678.2009.06.007

摘要

为解决结合在细胞上的可溶性蛋白聚乙烯醇脱氢酶(PVADH)的检测困难问题,从提取及检测两方面对该酶进行研究,并对检测方法进行改进.结果表明,非离子型表面活性剂Triton X-100对可溶性蛋白PVADH的提取效果优于离子型表面活性剂烷基苯磺酸钠(LAS)和溴化十六烷基吡啶(CPB),酶活力比LAS和CPB提取后所得酶活力分别提高246.5%和831.3%.而非离子型表面活性剂中,Triton X-100与Tween 80相比,所得最高酶活提高了101.4%.Triton X-100浓度和提取时间对测定有明显影响,以1% Triton X-100提取18 h为宜,最高比酶活达14.9 U/g.在PVADH检测体系中,加入电子受体启动反应比加入酶液与底物启动反应可使酶活性分别提高60.6%和126.5%;酶液与吡咯喹啉醌(PQQ)预先保温对检测该酶活性是十分重要的,可使酶活性提高59.1%.在检测系统中加入的KCN、CaCl_2 和PQQ的适宜浓度分别为1.0 mmol/L、0.5 mmol/L和2 μmol/L,可使测定酶活分别提高37.1%、38.7%和214.0%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李敏		15	32	4.0	4.0
3	陈坚		16	117	5.0	10.0
4	堵国成		11	58	4.0	7.0
7	廖鲜艳		1	1	1.0	1.0