O型口蹄疫病毒VP1蛋白的原核表达及功能鉴定

• 作者: 万博 乔松林 张改平 李学伍 杨苏珍 樊剑鸣 职爱民 鲍登克
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 口蹄疫病毒 VP1基因 原核表达 蛋白复性
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 页码范围: 11-14
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3196字
• 语种: 中文

摘要

为获得具有免疫原性的FMDV VP1蛋白,以O型FMDV重组质粒PMD18T-VP1为模板,利用PCR技术扩增得到O型FMDV VP1基因片段,将此基因片段与原核表达载体pET32a连接,构建重组表达载体,命名为pET-VP1,经PCR和测序鉴定后,用IPTG诱导表达,收集诱导的菌液进行SDS-PAGE电泳和Western-Blot分析.结果显示,在分子量约为45 ku处有1条明显的蛋白条带,且能被口蹄疫阳性血清识别,表达产物通过包涵体纯化后用透析法复性;ELISA检测结果显示,所复性的蛋白具有较高的活性.结果表明,FMDV VP1蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,为开发诊断制剂和疫苗的研制打下基础.