米曲霉木聚糖酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

• 作者: 吕熹 吴铭 李俊 王海娟 苏玉春 陈光
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 米曲霉 木聚糖酶 真核表达 毕赤酵母
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 343-346
• 分类号: Q78
• 字数: 2402字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2010.03.011

摘要

目的:构建米曲霉木聚糖酶基因的真核表达载体,并转化巴斯德毕赤酵母,进行分泌表达.方法:以米曲霉总RNA为模板,根据已知的米曲霉木聚糖酶基因序列设计引物,采用RT-PCR技术克隆木聚糖酶基因cDNA序列,将其与pPIC9K质粒连接构建表达载体后转化毕赤酵母,经MM/MD快慢斑筛选,得到Muts型重组子,进行甲醇诱导表达.结果:克隆得到的cDNA序列全长666 bp,连续编码221个氨基酸;阳性克隆子在诱导培养数天后,将菌液点于RBB-木聚糖平板上,产生了明显的透明圈,表明重组木聚糖酶在毕赤酵母中获得表达.结论:木聚糖酶基因的真核表达载体构建成功,并能够在毕赤酵母中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈光	吉林农业大学生命科学学院生物物理实验室	175	1299	19.0	26.0
2	王海娟	吉林农业大学生命科学学院生物物理实验室	3	31	3.0	3.0
3	苏玉春	吉林农业大学生命科学学院生物物理实验室	36	316	11.0	16.0
4	吴铭	吉林农业大学生命科学学院生物物理实验室	12	43	3.0	6.0
5	吕熹	吉林农业大学生命科学学院生物物理实验室	4	38	4.0	4.0
6	李俊	吉林农业大学生命科学学院生物物理实验室	9	39	4.0	6.0