小鼠β-防御素30的原核表达和纯化

• 作者: 李秀丽 汪莉 王玉民 田利源 胡亚欧
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: β-防御素30 抗菌肽 原核表达 亲和纯化 免疫避孕
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 328-331
• 分类号: Q78
• 字数: 3116字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2010.03.007

摘要

目的:在原核细胞中表达小鼠β-防御素30(DEFB30),并对表达产物进行鉴定和纯化.方法:用RT-PCR方法扩增小鼠Defb30的cDNA序列,将2个拷贝的cDNA序列串联连入原核表达载体pET28(a),构建重组表达载体pET28(a)-Defb30,并将重组表达载体转化至大肠杆菌Rosetta(DE3),IPTG诱导表达,以Western印迹分析表达产物His-DEFB30,用Ni-NTA亲和柱纯化融合蛋白.结果:构建了Defb30基因的原核表达载体,经IPTG诱导,相对分子质量约15×103的融合蛋白获得表达,Western印迹分析证实此蛋白即为目的蛋白,经Ni-NTA柱亲和纯化,获得了高纯度的融合蛋白His-DEFB30.结论:获得了在大肠杆菌中表达的DEFB30,为研究该蛋白的免疫避孕效果、抗菌活性奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪莉	军事医学科学院生物工程研究所	15	84	4.0	8.0
2	王玉民	军事医学科学院生物工程研究所	32	154	7.0	11.0
3	田利源	军事医学科学院生物工程研究所	12	53	4.0	7.0
4	李秀丽	军事医学科学院生物工程研究所	5	4	1.0	1.0
5	胡亚欧	军事医学科学院生物工程研究所	3	6	1.0	2.0