真核表达载体pcDNA3.1-myc-his(-)B的改构与应用

• 作者: 周建光 钱晓龙
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: pcDNA3.1-mys-his(-)B 改构 多克隆位点 pcDNA3.1(-)reconstruct 限制酶位点 目的基因
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 158-162
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3450字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2010.02.003

摘要

目的:对真核表达载体pcDNA3.1-myc-his(-)B进行改构,以简化目的基因克隆的步骤.方法:用事先设计好的2条寡核苷酸链互相退火,替换pcDNA3.1-myc-his(-)B的多克隆位点中Not Ⅰ与Hind Ⅲ间的部分;利用改构的真核表达载体,分别构建素环蛋白A、胆绿素还原酶B和过氧化氢酶基因的重组真核表达载体,瞬时转染293T细胞后,用His标签抗体验证其表达.结果:测序结果证实巳将预想的序列替换至pcDNA3.1-myc-his(-)B的多克隆位点中相应位置,改构为质粒pcDNA3.1(-)reconstruct;利用改构的真核表达载体表达了相应的目的基因.结论:改构的真核表达载体pcDNA3.1(-)reconstruct可以简化融合myc和His标签的目的基因克隆的过程,并且增加了限制性位点的可选择性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周建光	军事医学科学院生物工程研究所	74	296	8.0	14.0
2	钱晓龙	军事医学科学院生物工程研究所	12	23	3.0	4.0