花生Ara h6基因的克隆、表达以及免疫活性鉴定

• 作者: 刘小平 刘志刚 夏立新 李荔 闫浩 陈家杰
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 生物学
• 关键词: 花生 过敏原 Ara h6 基因克隆表达 免疫活性
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 173-175,181
• 分类号: Q789
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆花生主要过敏原Ara h6基因,诱导表达并纯化该蛋白,检测其免疫活性.方法:提取花生总RNA,设计特异性引物,RT-PCR克隆花生Ara h6的基因,将测序正确的片段连入原核表达载体pET-28a上,并转入BL21(DE3)宿主表达菌中,IPTG诱导袁达,通过Ni2+亲和层析柱纯化目的蛋白,Western-blotting检测该重组蛋白的免疫原性.结果:测序结果表明花生Ara h6目的片段全长为438bp,编码145个氨基酸,与GenBank中蛋白序列100%相同.该基因诱导表达的产物纯化后经SDS-PAGE鉴定为17kDa.Western-blotting结果表明该蛋白与花生过敏病人混合血清中IgE结合,具有免疫原性.结论:成功克隆花生过敏原Ara h6的基因,该基因表达的重组蛋白具有良好的免疫原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘志刚	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	324	1724	17.0	23.0
2	刘小平		21	89	6.0	8.0
3	陈家杰	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	9	96	6.0	9.0
4	李荔	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	28	143	8.0	10.0
5	夏立新	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	24	130	8.0	10.0
6	闫浩	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	13	74	5.0	8.0