小鼠钙网蛋白的原核表达和多克隆抗体的制备

• 作者: 刘朝奇 杨建林 汪龚泽 聂纪芹
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: 钙网蛋白 原核表达 抗体制备
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 291-295
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文

摘要

钙网蛋白(calreticulin,CRT)是存在于哺乳动物细胞具有高度保守性和多种生物学活性的蛋白,为了更好的研究其生物学活性,本课题组通过PCR方法扩增CRT截短基因,将其克隆到原核表达载体PET-28a(+)中,经大肠杆菌表达并纯化CRT蛋白.以纯化的CRT蛋白抗原免疫BALB/c小鼠,制备多克隆的CRT血清.进一步采用Western blot、ELISA、流式细胞术等技术对制备的抗体进行初步鉴定.结果显示:原核表达重组质粒在大肠杆菌中能高效表达CRT蛋白；获得多抗血清应用Western blot鉴定几种细胞株中CRT,流式细胞术检测CRT的外翻现象.因此我们得到结论——成功制备了CRT蛋白及其抗体,并有很好的特异性,能识别人鼠两种源性的CRT.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨建林		40	70	5.0	6.0
2	刘朝奇		171	552	10.0	15.0
3	汪龚泽		8	16	2.0	4.0
4	聂纪芹		4	12	1.0	3.0