Ⅰ型鸭肝炎病毒RNA聚合酶基因的克隆及原核表达

• 作者: 付玉志 刘光清 吴润 张伟伟 李传峰 杨宗伟 王超 陈宗艳
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ) RNA聚合酶基因(RdRp) 原核表达 序列分析
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 20-25
• 分类号: S858.322.659.6
• 字数: 3491字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2011.02.005

摘要

根据Ⅰ型鸭肝炎病毒（Duck hepatitis virus,DHV-Ⅰ）ZJ-Ⅴ株基因组序列（GenBank登录号：EF382778）,设计了一对扩增RNA聚合酶基因（RNA-dependent RNA polymerase,RdRp）的特异性引物,以ZJ-Ⅴ株基因组为模板,扩增DHV-Ⅰ的RdRp基因。运用DNAStar软件对ZJ-Ⅴ株病毒与GenBank上已发表的其他不同DHV毒株的RdRp基因序列进行同源性比较和遗传进化分析,结果表明,ZJ-Ⅴ株与A型DHV-ⅠR85952株（DQ226541）的同源性为97.1%,亲缘关系最近,与2株台湾新型（B型）DHV之间为76.9%和77.0%,与C-GY株和4株韩国新型（C型）DHV株之间为76.2%~76.5%,亲缘关系较远。将RdRp基因克隆至原核表达载体pET-32a（＋）,获得重组表达质粒pET-RdRp,转化宿主菌E.coli BL21（DE3）,用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE分析结果显示RdRp蛋白分子量约为65 kDa,Western blot检测证明RdRp蛋白能与Ⅰ型鸭病毒性肝炎阳性血清产生特异性免疫反应,具有良好的免疫学活性。本文为进一步研究DHV-Ⅰ的复制机理奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王超	浙江师范大学化学与生命科学学院	24	78	5.0	8.0
2	张伟伟	浙江师范大学化学与生命科学学院	3	5	2.0	2.0
3	付玉志	浙江师范大学化学与生命科学学院	1	0	0.0	0.0
4	陈宗艳	浙江师范大学化学与生命科学学院	1	0	0.0	0.0
5	李传峰	浙江师范大学化学与生命科学学院	1	0	0.0	0.0
6	杨宗伟	浙江师范大学化学与生命科学学院	1	0	0.0	0.0
7	吴润	浙江师范大学化学与生命科学学院	1	0	0.0	0.0