刚地弓形虫亲环蛋白基因TgCyP真核表达质粒的构建及其在Hela细胞内的表达

• 作者: 宫鹏涛 张西臣 李建华 李淑红 李赫 李运娜 杨举 黄金贵
• 来源期刊: 基因组学与应用生物学
• 学科: 生物学
• 关键词: 刚地弓形虫 TgCyP,基因克隆 真核表达
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 311-315
• 分类号: Q782
• 字数: 3326字
• 语种: 中文

摘要

亲环蛋白（cyclophilin，CyP）是一类广泛存在于原核和真核生物体内的胞溶性蛋白，是刚地弓形虫（Toxoplasmngondii）速殖子的主要成分，能够诱导产生IL-12和IFN-γ，在控制弓形虫急性感染过程中起重要作用。本研究根据GenBank发表的TgCyP基因序列，设计并合成一对包含BamHI和EcoRI酶切位点的引物，以cDNA为模板，应用PCR技术扩增TgCyP基因。PCR产物连接到pMD18-T克隆载体。用限制性内切酶BamHI和EcoRI双酶切克隆载体，将TgCyP目的基因克隆到载体pVAXI，构建真核表达质粒pVAXl-TgCyP。将真核表达质粒转染Hela细胞，利用问接免疫荧光检测其在Hela细胞内的表达情况。结果表明扩增的TgCyP基因与GenBank上相应基因序列（U04633．1）的一致性达100％，构建的真核表达质粒pVAX1-TgCyP能在转染的Hela细胞中表达，其表达产物与刚地弓形虫阳性血清具有免疫反应性。本研究表明Tg-CyP有望作为弓形虫疫苗的候选抗原，将为进一步研究该质粒的动物免疫试验奠定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张西臣	吉林大学白求恩医学院	211	623	11.0	18.0
2	李建华	吉林大学白求恩医学院	302	1731	21.0	33.0
3	宫鹏涛	吉林大学白求恩医学院	134	291	8.0	14.0
4	李赫	吉林大学白求恩医学院	73	85	5.0	7.0
5	杨举	吉林大学白求恩医学院	82	183	8.0	11.0
6	李淑红	吉林大学白求恩医学院	37	244	10.0	13.0
7	李运娜	吉林大学白求恩医学院	7	15	2.0	3.0
8	黄金贵	吉林大学白求恩医学院	6	12	2.0	3.0