人β2-glycoproteinⅠ及其第Ⅴ结构域蛋白的原核表达、纯化和活性鉴定

• 作者: 刘庆平 李敬达 李文哲 王仁军 王贺 迟彦 马艳华
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: β2-GPI β2-GPI及第Ⅴ结构域 原核表达 动脉粥样硬化
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 11-17
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

目的:旨在重组表达人源β2-GPI及其第Ⅴ结构域基因,探讨后者在抗自身免疫性动脉粥样硬化实验中的干预作用.方法:以实验室保存的CTA727-1重组质粒为模板克隆β2-GPI及其第Ⅴ结构域基因,构建pET32-β2-GPI和pET32-DV重组表达载体,分别转化至大肠杆菌Rosetta-gami.经IPTG诱导表达,镍离子亲和层析柱纯化重组蛋白,并采用Western blot、HPTLC和ELISA方法验证了重组蛋白的活性与功能.结果:β2-GPI及其第Ⅴ结构域目的基因被分别克隆至原核表达载体pET-32a-c(+),诱导出具备CL和oxLig-1结合活性的β2-GPI及第Ⅴ结构域融合蛋白,ELISA实验显示第Ⅴ结构域融合蛋白可抑制oxLig-1/ (r) β2-GPI/Antibody免疫复合物的形成.结论:成功构建了pET32-β2-GPI及pET32-DV表达载体,获得高水平表达且具备活性的β2-GPI和第Ⅴ结构域重组蛋白,为研究治疗动脉粥样硬化等疾病的多肽药物奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	迟彦	大连大学生命科学与技术学院生物有机化学重点实验室	27	347	8.0	18.0
2	王仁军	大连大学生命科学与技术学院生物有机化学重点实验室	21	105	6.0	10.0
3	李文哲	大连大学生命科学与技术学院生物有机化学重点实验室	6	31	2.0	5.0
4	王贺	大连大学生命科学与技术学院生物有机化学重点实验室	2	2	1.0	1.0
5	马艳华	大连大学生命科学与技术学院生物有机化学重点实验室	1	2	1.0	1.0
6	李敬达	大连大学生命科学与技术学院生物有机化学重点实验室	4	5	2.0	2.0
7	刘庆平		1	2	1.0	1.0