不同激酶活性的hPAK6基因原核表达载体的构建及重组蛋白的表达

• 作者: 刘彤 朱戈 李丰 李洋
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: PAK6基因 激酶活型 激酶死型 原核表达 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2011,（12）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1057-1059,1071
• 分类号: R329.12
• 字数: 2910字
• 语种: 中文
• DOI: 21-1227/R.20111226.1611.001

摘要

目的 构建不同激酶活性的hPAK6原核表达载体并诱导和鉴定其融合蛋白表达.方法 野生型、激酶活型和激酶死型pcDNA3.1-PAK6经EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切后,克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,在E.coli BL21中诱导不同型GST-hPAK6融合蛋白表达,并经免疫印迹鉴定结果.结果 野生型、激酶活型和激酶死型hPAK6编码序列已被克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,双酶切及测序鉴定正确,并在E.coli BL21中获得了诱导表达,蛋白的分子量均为101 kDa,免疫印迹检测到了融合蛋白表达.结论 成功构建不同激酶活性的hPAK6基因原核表达载体,并分别诱导表达出GST-PAK6融合蛋白.