小鼠雄激素受体真核表达载体的构建及稳定转染TM4细胞系的建立与鉴定

• 作者: 刘彦慧 张巧霞 张晓燕 桂耀庭
• 来源期刊: 中国男科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 转染 载体构建 精子发生
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3-6
• 分类号: R392.8
• 字数: 2846字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0848.2012.05.001

摘要

目的 构建小鼠雄激素受体(androgen receptor,AR)基因真核表达载体,转染TM4细胞,建立稳定转染AR的TM4细胞系.方法 应用RT-PCR方法从小鼠睾丸中扩增AR,将测序正确的PCR产物克隆至pcDNA3.1(-)真核表达载体中,将载体以脂质体方式转染至TM4细胞,通过G418筛选稳定转染AR的TM4细胞株,以RT-PCR和Western-blot检测AR在转染前后TM4细胞中的表达情况.结果 成功构建了pcDNA3.1(-)/AR表达质粒,建立了稳定转染的TM4细胞系.RT-PCR和Western-blot检测结果表明,AR基因在该细胞系中成功表达.结论 AR真核表达载体成功构建和稳定转染TM4细胞系的建立为进一步体外研究AR的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	桂耀庭	北京大学深圳医院男性生殖医学实验室	78	236	9.0	11.0
2	刘彦慧		16	72	6.0	8.0
3	张晓燕		16	85	6.0	8.0
4	张巧霞	北京大学深圳医院男性生殖医学实验室	2	1	1.0	1.0