显色底物磷脂酰肌醇的酶法制备及应用效果研究

• 作者: 吴清平 张菊梅 李琳
• 来源期刊: 现代化工
• 学科: 工学
• 关键词: 磷脂酰肌醇 磷脂酶D 单核细胞增生性李斯特菌 高效液相色谱
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 科研与开发
• 页码范围: 60-63
• 分类号: TQ463
• 字数: 2416字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-4320.2012.07.015

摘要

磷脂酰肌醇( phosphatidylinositol,PU可以作为特异性底物对单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)进行快速检测.传统的PI分离方法效率不高,难以得到单一磷脂.而利用磷脂酶D( phospholipase D)的磷脂转移特性,水解大豆磷脂中除PI以外的成分,可以得到高纯度PI.通过单因素和正交试验设计,优化phospholipase D水解大豆磷脂的条件.实验结果表明,在100 mg大豆粉末磷脂中加入phospholipase D(≥50,000 units/mL) 2.0 μL,在37℃下反应4h得到纯度达到86.67％的PI.进一步将制备产物用于显色培养基,经细菌试验显示了对LM具有特异的显色效果,可以作为昂贵的进口底物的替代品应用.