PMA—LAMP方法检测灭菌乳中金黄色葡萄球菌的研究

• 作者: 刘珊珊 刘颖 卢雁 姜毓君 杨士芹 满朝新 胡惠秩 董鑫悦 薛玉清 谢鲲昊
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: PMA—LAMP 金黄色葡萄球菌 乳 检测
• 年，卷（期）: 2012,（21）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 300-304,308
• 分类号: TS207.3
• 语种: 中文

摘要

近年来，金黄色葡萄球菌引起的食品安全事件频发，这就需要建立一种快速准确地检测食品中金黄色葡萄球菌的方法。传统方法检测食品中金黄色葡萄球菌活菌存在很多缺点。由于细胞死亡后其DNA依然能够存活许久，所以传统方法不能有效区分DNA来自死菌还是活菌。通过荧光染料PMA与快速检测技术LAMP相结合的方法快速、灵敏的检测灭菌乳中金黄色葡萄球菌，并对死／活菌进行区分。根据金黄色葡萄球菌nuc基因设计引物，并对LAMP反应体系及PMA-LAMP方法进行优化，同时优化了灭菌乳中提取DNA的方法。在纯培养的金黄色葡萄球菌中，PMA—IAMP方法检测灵敏度为3．2CFU／mL，PMA—PCR方法的检测灵敏度为3．2×102CFU／mL；对人工污染灭菌乳中的金黄色葡萄球，PMA—IAMP方法检测灵敏度为5×101CFU／mL，而PMA—PCR方法检测灵敏度为5×103CFU／mL。整个反应需要大约6h，说明PMA—LAMP方法检测灭菌乳中金黄色葡萄球菌特异性强、灵敏度高、时间短且操作简便，有望成为快速检测金黄色葡萄球菌活菌的新方法。