人p53启动子萤光素酶报告基因的构建及其活性测定

• 作者: 刘家宏 叶棋浓 吕朝晖 徐小洁 朱建华 符静 肖文华 范忠义 陆菊明
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: p53启动子 萤光素酶报告基因 转录活性
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 页码范围: 41-44
• 分类号: Q78|Q75
• 字数: 2816字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2013.01.009

摘要

目的:克隆p53基因的启动子,插入萤光素酶报告基因载体,并检测启动子活性.方法:采用PCR技术从人肝癌细胞系HepG2基因组中扩增人p53启动子,插入萤光素酶报告基因载体pGL4.0-empty,将重组质粒转染293T、ZR75-1、HepG2、A549细胞,测定p53启动子的转录活性.结果:构建了p53启动子的萤光素酶报告基因;通过测序及质粒酶切鉴定,所构建的p53启动子正确;活性实验表明,报告基因在多种细胞中显示构建的p53启动子活性,并呈现一定的剂量效应;转录因子USF能以剂量效应方式提高p53报告基因的转录活性.结论:克隆了人p53启动子,为进一步研究调控p53的转录因子奠定了基础.