新疆卡拉库尔羊TNF-α原核表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 李莲瑞 潘伊微 潘辉 贺艳艳 贾山岭
• 来源期刊: 新疆农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 卡拉库尔羊TNF-α 表达纯化 抗原性分析
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 页码范围: 572-577,582
• 页数: 7页
• 分类号: S826|S852.16
• 字数: 3710字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6048/j.issn.1001-4330.2013.03.028

摘要

[目的]克隆卡拉库尔羊TNF-α基因,在大肠杆菌中表达、纯化,并对TNF-α蛋白的抗原性进行分析.[方法]采用PCR技术扩增TNF-α基因核酸片段,并克隆入pET-28b表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)株中表达.用电洗脱法纯化目的蛋白,并用免疫印迹法分析纯化蛋白的抗原特异性.[结果]重组质粒在BI21 (DE3)菌株中经IPTG诱导表达一个相对分子质量约为49 KD的融合重组蛋白,原核表达质粒pET-28b-TNF-α表达的目的融合蛋白是以可溶的形式存在.用纯化的pET-28b-TNF-α免疫家兔,在免疫后的第45 d,Westem-blotting和琼脂糖扩散试验分析表明,表达的pET-28b-TNF-α能被家兔的阳性血清所识别.[结论]表达蛋白pET-28b-TNF-α具有较好的反应原性和免疫原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贺艳艳	塔里木大学生命科学学院	13	32	3.0	5.0
2	潘辉	塔里木大学生命科学学院	14	34	3.0	5.0
3	李莲瑞	塔里木大学动物科学学院	22	64	4.0	7.0
4	潘伊微	塔里木大学生命科学学院	5	4	1.0	2.0
5	贾山岭	塔里木大学生命科学学院	7	9	1.0	3.0