hIFN-γ腺病毒表达载体的快速构建及鉴定

• 作者: 刘敏 张建肖 李娜 王珍光 赵强元 郭建巍 陈昌国
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 关键词: 干扰素γ,重组 腺病毒科 遗传载体
• 年，卷（期）: 2013,（13）
• 所属期刊栏目: 基础实践研究论著
• 页码范围: 1635-1637
• 页数: 3页
• 字数: 2411字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2013.13.002

摘要

目的 快速构建hIFN-γ腺病毒载体.方法 Trizol法提取IFN-γ(10 ng/mL)刺激的Raji细胞总RNA,以Oligo引物进行反转录获得cDNA序列,PCR法钓取人hIFN-γ的cDNA序列并插入pAdTrack-CMV载体中获得pAdTrack-CMV-hIFN-γ表达载体;然后将pAdEasy-1电转入BJ5183感受态菌并通过硫酸链霉素和氨苄青霉素双抗筛选获得pAdEasy-1-BJ5183感受态菌;之后将PmeI线性化的pAdTrack-CMV-hIFN-γ电转入pAdEasy-1-BJ5183感受态菌中并通过卡那霉素抗性筛选获得pAdEasy-1-B J5183-pAdTrack-CMV-hIFN-γ重组体;Pac Ⅰ酶切鉴定.结果 成功获得pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-hIFN-γ腺病毒表达载体.结论 改良的两步法腺病毒表达载体的构建效率远高于同时将线性化pAdTrack-CMV-hIFN-γ与pAdEasy-1电转入BJ5183感受态菌以获得重组体传统方法,节省了实验时间和实验材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李娜	中国人民解放军海军总医院检验科	218	722	14.0	20.0
2	刘敏	中国人民解放军海军总医院检验科	120	627	13.0	22.0
3	陈昌国	中国人民解放军海军总医院检验科	12	39	4.0	5.0
4	赵强元	中国人民解放军海军总医院检验科	24	69	4.0	6.0
5	王珍光	中国人民解放军海军总医院检验科	7	4	1.0	2.0
6	郭建巍	中国人民解放军海军总医院检验科	15	35	4.0	5.0
7	张建肖	中国人民解放军海军总医院检验科	3	10	1.0	3.0