新型抗体结合蛋白CBD-SPG的设计与表达

• 作者: 周海燕 段作营 金坚 陈蕴 马军 龚笑海
• 来源期刊: 工业微生物
• 关键词: 纤维素结合结构域 蛋白G 纯化抗体
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 研究与应用
• 页码范围: 37-41
• 页数: 5页
• 字数: 2754字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2014.02.007

摘要

设计并表达可用于纯化IgG的新型高载量抗体结合蛋白CBD-SPG.利用基因重组技术将纤维素结合结构域(Cellulose Binding Domain,CBD)基因插入到表达载体pET28a-SPG中,获得重组质粒pET28a-CBD-SPG,并转化大肠杆菌BL2I(DE3).IPTG诱导CBD-SPG融合蛋白表达,并用SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行鉴定.重组表达质粒pET28a-CBD-SPG经双酶切及测序验证无误;表达产物经SDS-PAGE和Western Blot分析表明融合蛋白的表现分子量约为40kD;CBD-SPG具有良好的结合纤维素和抗体的能力,晶体纤维素Avicel ph101对CBD-SPG的载量可达11.61 mg/g(w/w).成功构建并运用原核系统表达CBD-SPG;CBD-SPG在保持良好抗体结合能力的同时,更具有了结合纤维素的能力,有望成为一种新型的亲和材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金坚	江南大学药学院	196	1025	16.0	22.0
2	段作营	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	84	674	14.0	21.0
3	陈蕴	江南大学药学院	85	685	13.0	23.0
4	周海燕	江南大学药学院	7	39	3.0	6.0
5	龚笑海	江南大学药学院	7	5	1.0	2.0
6	马军	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	3	4	1.0	2.0