唾液乳杆菌XH4B的α-半乳糖苷酶纯化及性质研究

• 作者: 何国庆 刘同杰 杜新永 高世阳
• 来源期刊: 现代食品科技
• 关键词: 乳酸菌 唾液乳杆菌 α-半乳糖苷酶 超滤 凝胶过滤 酶学性质
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 工艺技术
• 页码范围: 137-142,184
• 页数: 7页
• 语种: 中文

摘要

本研究通过超滤、Sep hedax G200凝胶过滤层析纯化来源于唾液乳杆菌XH4B(GeneBank索引号:JX125456)的α-半乳糖苷酶,并对其酶学性质进行了研究.结果表明,超滤时采用100 kDa的滤膜,分子量大于100 kDa的组分有酶活.利用Sephadex G200进行柱层析洗脱至370～400 min时得到的组分表现出明显的α-半乳糖苷酶活力.SDS-PAGE电泳结果表明,该酶的蛋白质单体分子量为70～80 kDa,未变性的酶蛋白应为多聚体,总分子量大于100 kDa.利用酶比活力计算的结果,相对于粗酶,超滤纯化效率为149.80％,柱层析纯化效率为391.91％.经响应面优化,确定唾液乳杆菌XH4B来源的α-半乳糖苷酶最佳酶促反应条件为:柠檬酸缓冲液pH值5.5,离子强度0.15 mol/L,反应温度52℃.该酶对pNPG的Km值为0.817.相对于纯水,各类金属离子中,仅有K+和Na+对酶活力有正向的激活作用,酶活力分别达到了102.50％和104.18％. EDTA (96.54％),Mg2+ (91.53％),Ca2+ (82.51％),以及DTT (79.38％)能够较大限度保留酶活力,而Zn2+、Cu2+、pb2+、Fe3+和Vc则显著阻碍了酶促活力,仅能保留5～7％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何国庆		279	3858	34.0	45.0
2	刘同杰		8	12	2.0	3.0
3	高世阳		3	0	0.0	0.0
4	杜新永		2	0	0.0	0.0