牛凝乳酶原基因在毕赤酵母中的表达及其酶学特性的研究

• 作者: 张富春 普燕 杨艺
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 牛凝乳酶 毕赤酵母 分泌表达 酶学特性 金属离子
• 年，卷（期）: 2014,（15）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 188-192
• 分类号: TS201.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2014.15.032

摘要

凝乳酶是制造干酪的关键酶.为获得高活性的牛凝乳酶(chymosin,B-chy),用电脉冲法将线性化的pGAPZαA-B-pchy重组表达载体转化到毕赤酵母GS115中.该菌株在以葡萄糖为碳源的YPD培养基中可分泌表达牛凝乳酶原.SDS-PAGE分析表明所表达的牛凝乳酶,分子量约为37ku,符合预期大小.发酵培养96h后,酶活力达到96SU/mL.酶学特性分析表明,其最适凝乳温度为60℃,在pH2～6、小于50℃的温度范围内稳定.Ca2+浓度为40mmol/L时,钙促酶反应活性达到最高,此后随着Ca2+浓度的增加酶活力逐渐降低.金属离子Al3+、Mn2、Fe2、Mg2+和K+对酶活力具有显著的促进作用,而Co2、Zn2、Cu2、Ni2+对酶活力具有显著的抑制作用.本研究优化了凝乳酶的表达条件,为凝乳酶工业化生产提供了理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张富春	新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源与基因工程重点实验室	286	2034	23.0	31.0
2	普燕	新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源与基因工程重点实验室	17	37	4.0	5.0
3	杨艺	新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源与基因工程重点实验室	6	3	1.0	1.0