Paenibacillus sp．K1α-半乳糖苷酶酶学性质

• 作者: 孔健 孔文涛 辛永平 陆文伟
• 来源期刊: 山东大学学报（理学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 类芽孢杆菌 α-半乳糖苷酶 酶学性质
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 页码范围: 50-55
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 4535字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6040/j.issn.1671-9352.0.2014.182

摘要

利用CODEHOP PCR和Anchor-ligated PCR方法从类芽孢杆菌Paenibacillus sp．K1中克隆得到一个α-半乳糖苷酶基因agaP1，大小为2190 bp，同源性分析显示，该基因与其他α-半乳糖苷酶基因的序列相似低，是一个新的α-半乳糖苷酶基因。将agaP1在大肠杆菌Origami B （DE3）中表达并纯化获得AgaP1，酶学性质分析显示：以pNPG为底物时，AgaP1最适反应温度为40℃，最适pH 6.5～10，Km 值为0.75 mmol／L，最大反应速率 Vmax为1.96μmol·min－1·mg－1。同时Fe2＋、Mg2＋、Ca2＋、K＋和甘油能使α-半乳糖苷酶酶活提高1～3倍，而 Cu2＋、Zn2＋、Fe3＋和还原型谷胱甘肽则抑制该酶的活性。SDS-PAGE检测AgaP1蛋白大小约为80 ku，与理论预测值基本一致；Native-PAGE分析表明正常条件下AgaP1蛋白以二聚体或六聚体形式存在。以上结果显示，Paenibacillus sp．K1产生的α-半乳糖苷酶为一个新的低温α-半乳糖苷酶。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孔健	山东大学微生物技术国家重点实验室	44	852	15.0	28.0
2	辛永平	山东大学微生物技术国家重点实验室	1	5	1.0	1.0
3	陆文伟	山东大学微生物技术国家重点实验室	1	5	1.0	1.0