埃可病毒9型VP1蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

• 作者: 张国忠 潘劲草 濮小英 王咪咪 邱晓枫 黄志成
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 埃可病毒9型 病毒性脑炎 VP1基因 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 951-953,965
• 页数: 4页
• 分类号: R373.2+4
• 语种: 中文

摘要

目的 原核表达并纯化埃可病毒9型(ECHO9) VP1蛋白,免疫兔子制备多克隆抗体,鉴定重组蛋白的免疫活性,为ECHO9血清学检测试剂和疫苗研究提供依据.方法 PCR方法扩增VP1基因,构建原核表达质粒pET28a-VP1并转化到大肠杆菌(E.coli BL21),诱导表达并纯化VP1重组蛋白,免疫兔子制备抗VP1多克隆抗体,ELISA检测抗VP1抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性.病毒中和试验鉴定抗体中和ECHO9病毒的能力.结果 VP1重组蛋白在大肠杆菌BL21中高效表达,制备的抗VP1抗体效价为1∶105.Western blot检测结果显示,抗VP1多克隆抗体可以识别原核表达的VP1蛋白.中和试验显示抗体对ECHO9病毒有中和作用,其效价为1∶10.结论 本研究成功原核表达了ECHO9的VP1蛋白并制备出抗VP1多克隆抗体,有助于ECHO9的临床诊断、疫苗开发和分子病毒学研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘劲草		72	465	12.0	18.0
2	黄志成		26	85	5.0	7.0
3	邱晓枫		17	55	5.0	6.0
4	濮小英		13	50	5.0	6.0
5	王咪咪		9	45	3.0	6.0
6	张国忠		4	20	1.0	4.0