原核表达载体pET30a/ATRX-C2193-2492的构建与诱导表达

• 作者: 万艳平 刘志敏 唐双阳 李冉辉 申海艳 蔡恒玲 赵兰华
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: ATRX 原核表达载体 诱导表达 蛋白
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 516-520
• 页数: 5页
• 分类号: Q812
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2016.06.0087

摘要

[目的]构建大鼠ATRX抗原端氨基酸序列的原核表达载体,为进一步制备ATRX多克隆抗体以及探讨ATRX蛋白在HPV16致宫颈癌中的作用奠定基础.[方法]以IF-GFP-ATRX质粒为模板,PCR扩增获得ATRX-C2193-2492基因片段,并克隆至pET30a(+)空载体上,转化E.coli BL21感受态细胞,构建原核表达载体pET30a/ATRX-C2193-2492,经PCR、双酶切以及测序鉴定.将构建好的质粒pET30a/ATRX-C2193-2492转化,经IPTG诱导表达,利用镍离子亲和层析法纯化6His-ATRX-C2193-2492蛋白.[结果]成功获得900 bp的ATRX-C2193-2492基因片段并构建了原核表达载体pET30a/ATRX-C2193-2492,且该载体能在E.coli中诱导表达分子量约34 kDa蛋白产物.[结论]原核表达载体pET30a/ATRX-C2193-2492能成功诱导表达分子量约34 kDa的ATRX-C2193-292蛋白,该蛋白纯化产物能为后续ATRX多克隆抗体的制备提供实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	万艳平		157	780	13.0	20.0
2	唐双阳		71	348	11.0	15.0
3	蔡恒玲		40	109	6.0	8.0
4	赵兰华		7	10	2.0	2.0
5	申海艳		17	104	6.0	10.0
6	李冉辉		19	20	2.0	3.0
7	刘志敏		4	7	1.0	2.0