GTP结合蛋白4基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定

• 作者: 刘勋 杨志惠 陈明
• 来源期刊: 泸州医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: GTPBP4基因 RNA干扰 慢病毒载体 结肠癌
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 556-559
• 页数: 4页
• 分类号: R78|Q75
• 字数: 3438字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2669.2016.06.016

摘要

目的：：为了建立GTPBP4基因沉默的人结肠癌细胞株，研究GTPBP4基因对人结肠癌细胞株RKO细胞增殖和凋亡的影响，构建并鉴定GTPBP4基因RNA干扰慢病毒载体。方法：针对GTPBP4 mRNA设计siRNA ，构建pGCSIL-GFP-GTPBP4慢病毒载体，感染293T细胞，包装产生慢病毒，并进行滴度测定。将慢病毒转染人结肠癌细胞株RKO，通过Real-time PCR和Western Blot分析GTPBP4基因敲减效率。结果：结果显示，插入DNA序列与目的基因序列一致，提示插入人GTPBP4基因序列正确。293T细胞中病毒滴度的测定结果2×108 TU/mL。经siRNA慢病毒感染后，实验组RKO GTPBP4基因mRNA水平表达量受到显著抑制，Western Blot结果显示敲减效率达到72.9%。结论：GTPBP4基因RNAi慢病毒载体构建成功，可用于结肠癌生物行为等各方面的研究。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨志惠	西南医科大学附属医院病理科	15	39	4.0	6.0
2	陈明	西南医科大学附属医院病理科	6	16	3.0	4.0
3	刘勋	西南医科大学附属医院病理科	3	10	2.0	3.0