甲型血友病家系的直接和间接基因诊断

• 作者: 曹颖 李红智 洪淑贞 窦瑞艳 赵胜科 郑天津 陈靖 黄蓉
• 来源期刊: 中国优生与遗传杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 甲型血友病(HA) 直接基因诊断 倒位 间接基因诊断 单体型
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 分子遗传学与生化遗传学
• 页码范围: 38-43,8
• 页数: 7页
• 分类号: R554.11
• 语种: 中文

摘要

目的 该研究针对温州地区甲型血友病(HA)家系,首先进行直接基因诊断,然后根据可变数目串联重复序列(VNTR)多态性、短串联重复序列(STR)多态性和限制性片段长度多态性(RFLP)进行间接基因诊断,为基于HA症状前、携带者基因诊断结果的遗传咨询和生育指导提供依据.方法 针对HA先证者及其有关家系成员,首先采用倒位位移PCR(IS-PCR)进行凝血因子Ⅷ (FⅧ) inv22、de122、dup22、inv1的检测.然后进行单体型基因连锁分析.采用PCR检测FⅧ基因外的DXS52 (St14)位点的VNTR多态性,检测FⅧ基因外的DXS15 (CA)n、DXS9901 (GT)n、DXS1073 (GT)n位点和内含子1 (GT)n、13 (CA)n、22 (GT)n(AG)n、24 (GT)n位点的STR多态性并经毛细管电泳确证.另外采用PCR产物限制酶切检测FⅧ基因的内含子18、19、22位点的RFLP多态性.结果 以2个HA家系为例报道研究结果.家系三的先证者为远端Inv22患者,先证者母亲为远端inv22携带者,先证者父亲为正常者.先证者、先证者母亲、先证者父亲均未发生de122或dup22,并且均未发生inv1.家系五先证者外婆肯定不是携带者,先证者的X染色体来自外公,但已知外公不是患者,那么按照最大风险估计,母亲的那条来自外公的X染色体在外公生殖细胞中FⅧ基因发生了突变,因此母亲是携带者.结论该研究的HA家系的直接和间接基因诊断,特别是对症状前男孩的诊断、对未曾有患病后代的女性携带者的检出,具有非常重要的实际意义,可以为遗传咨询和生育指导提供可靠依据.