BimS慢病毒RNA干扰载体的构建及其感染效率和干扰效果的实验研究

• 作者: 姚佳 李旭奎 饶国洲
• 来源期刊: 实用口腔医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: RNA干扰 BimS基因 慢病毒表达载体
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 36-40
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3971字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-3733.2017.01.008

摘要

目的:应用RNA干扰技术构建BimS慢病毒RNA干扰载体,探讨其感染效率和干扰效果.方法:针对人BimS设计3个干扰靶点,将单链引物退火成双链oligo序列,连接入Age Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切线性化载体中.将重组质粒进行病毒包装、并且通过感染ACC-2细胞观察其感染效率,定量PCR检测其对BimS mRNA干扰效果.结果:PCR产物经扩增电泳后阳性克隆得到337bp条带,插入序列片段与DNA测序结果完全相符.重组慢病毒载体在293T细胞中包装获得滴度为2×10s TU/ml的病毒颗粒,MOI=20,转染效率为85％.转染pFU-GV-BmS-1组、pFU-GV-BmS-2组及对照组BmS mRNA相对表达水平分别为:0.743±0.025、0.466±0.023、1.266±0.042(组间两两比较,P＜0.05).结论:BimS慢病毒RNA干扰载体构建成功,并能高效感染ACC-2细胞及下调BmS mRNA表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李旭奎	西安交通大学口腔医院口腔颌面外科	14	48	4.0	6.0
2	饶国洲	西安交通大学口腔医院口腔颌面外科	64	326	9.0	14.0
3	姚佳	西安交通大学口腔医院口腔颌面外科	6	21	3.0	4.0