布鲁菌L7/L12蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 吴娟 张冬星 成璐 李影
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 布鲁菌 L7/L12蛋白 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 10-14
• 页数: 5页
• 分类号: S852.614
• 字数: 4850字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2018.12.003

摘要

为制备布鲁菌(Brucella)L7/L12蛋白及其小鼠源多克隆抗体,根据猪布鲁菌(Brucella suis)S2株L7/L12基因序列,设计合成特异性引物,PCR扩增L7/L12基因并将其克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-28a-L7/L12,经鉴定正确后转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞进行诱导表达.SDS-PAGE分析表明,重组菌经IPTG诱导后成功表达出分子质量为17 ku的重组蛋白.将诱导表达的蛋白经镍柱亲和层析纯化后免疫小鼠制备多克隆抗体,并测定其抗体效价.Western blot结果表明,原核表达后纯化的L7/L12蛋白能够与制得的小鼠抗L7/L12蛋白多克隆抗体特异性结合.成功获得了纯化的L7/L12重组蛋白和小鼠抗L7/L12多克隆抗体,为进一步研究L7/L12蛋白对布鲁菌感染的诊断方法和基因工程疫苗的研发奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李影	吉林农业大学动物科学技术学院	69	301	8.0	13.0
2	张冬星	吉林农业大学动物科学技术学院	24	12	2.0	2.0
3	成璐	吉林农业大学动物科学技术学院	1	1	1.0	1.0
4	吴娟	吉林农业大学动物科学技术学院	2	1	1.0	1.0