禽CD133胞外结构域原核表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 俞向前 章乔艳 谭勋 邵冯金
• 来源期刊: 浙江大学学报（农业与生命科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: CD133蛋白 多克隆抗体 家禽
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 动物科学与动物医学
• 页码范围: 743-747
• 页数: 5页
• 分类号: Q786|S858.31
• 字数: 3894字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2017.08.152

摘要

为构建禽CD133胞外区原核表达载体,制备抗CD133多克隆抗体,在生物信息学分析的基础上,选取禽CD133蛋白N端胞外区一段由89个氨基酸残基构成的肽段作为候选抗原,通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增其编码基因,亚克隆至pET-28a(+)表达载体,转化大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞,用异丙基β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达;目的蛋白经镍柱纯化后免疫BALB/c小鼠,制备抗血清.结果表明,构建的原核表达载体可高效表达CD133重组蛋白.蛋白质印迹法(Western-blotting)证实鼠抗禽CD133血清可特异性识别CD133重组蛋白.免疫组化染色结果显示,该抗血清可用于检测组织中的CD133阳性细胞.上述结果表明,利用禽CD133蛋白N端胞外结构域重组蛋白为抗原成功制备出了抗禽CD133多克隆抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	俞向前		9	16	2.0	3.0
2	谭勋	浙江大学动物科学学院	13	121	6.0	11.0
3	邵冯金	浙江大学动物科学学院	2	0	0.0	0.0
4	章乔艳	浙江大学动物科学学院	1	0	0.0	0.0