脯氨酸氨肽酶枯草芽孢杆菌分泌表达及特性表征

• 作者: 汪克红 王开道 田亚平
• 来源期刊: 食品与生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 脯氨酸氨肽酶 枯草芽孢杆菌 分泌表达 特性表征
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1135-1140
• 页数: 6页
• 分类号: Q55
• 字数: 3271字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2018.11.003

摘要

构建重组枯草芽孢杆菌大量分泌米曲霉脯氨酸氨肽酶,纯化后对其基本酶学性质进行表征.将脯氨酸氨肽酶cDNA序列从载体pMD19-pap上克隆后连接到载体pMA5上得到重组质粒,转化枯草芽孢杆菌WB600后进行分泌表达.通过在培养基中加入5％ D-山梨醇和2 mmol/LCaCl2,胞外酶活由7.5 U/mL提高到36 U/mL.通过硫酸铵盐析、Hitrap Q和SuperdexTM 75对重组脯氨酸氨肽酶进行了纯化,纯化后的比酶活为247.3 U/mg,纯化倍数达到8.8倍.该酶最适温度为50℃,最适pH为7.5,米氏常数Km和最大反应速率Vmax分别为0.171 mmol/L和55.99μmol/(L·min).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田亚平	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	72	388	11.0	15.0
2	汪克红	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	1	0	0.0	0.0
3	王开道	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	1	0	0.0	0.0