嗜酸芽孢杆菌普鲁兰酶在大肠杆菌中的表达及发酵优化

• 作者: 吴敬 杨向会 陈晟
• 来源期刊: 食品与机械
• 关键词: 普鲁兰酶 重组表达 发酵优化 pH 甘氨酸
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 20-26
• 页数: 7页
• 字数: 5733字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13652/j.issn.1003-5788.2018.05.005

摘要

为了在3L发酵罐水平上提高重组菌E.coli BL 21(DE3)/ pET20b(+)-BapulA的普鲁兰酶的表达量和胞外分泌,将嗜酸芽孢杆菌普鲁兰酶(Bacillus acidopullul yticus)在大肠杆菌中进行重组表达,并在3L发酵罐水平上对重组菌进行发酵优化,考察了发酵条件对重组酶表达的影响.重组菌发酵的最佳条件为:发酵前期菌体生长温度和pH分别为30℃和7.0,当菌体浓度OD600达到50时,发酵温度降低至25℃,此时调节pH为6.2,同时开始流加乳糖[0.4 g/(L·h)]进行诱导;在发酵过程中,当菌体浓度OD600依次达到15,45,75时,分别加入浓度为1.5 g/L的甘氨酸,当菌体OD600为105时,再加入浓度为3 g/L的甘氨酸.发酵结束后普鲁兰酶的胞外酶活达659.0 U/mL,最高总酶活达1 910.1 U/mL,与摇瓶的初始总酶活(41.1 U/mL)和胞外酶活(6.5 U/mL)相比,分别提高了45.4倍和100倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈晟	江南大学食品科学与技术国家重点实验室	26	113	6.0	9.0
10	杨向会	江南大学食品科学与技术国家重点实验室	1	0	0.0	0.0