多粘类芽孢杆菌新普鲁兰酶基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 何海宁 张春园 张鸣明 李素岳 梁宁 胡先望
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 新普鲁兰酶 多粘类芽孢杆菌 大肠杆菌 克隆和表达
• 年，卷（期）: 2020,（15）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 119-123,128
• 页数: 6页
• 分类号: TS201.3
• 字数: 4943字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2020.15.019

摘要

为了使新普鲁兰酶基因在大肠杆菌中表达并实现高密度发酵生产,采用PCR方法从多粘类芽孢杆菌基因组DNA中扩增出新普鲁兰酶基因Npu,测序结果表明Npu基因全长2106 bp,编码515个氨基酸,与其他多粘类芽孢杆菌新普鲁兰酶基因序相似性高达99％.将Npu基因连接到质粒PMD18T上,构建了PMD18T-Npu vecter重组载体.将该重组裁体转化到大肠杆菌BL21中,该酶基因在大肠杆菌细胞中获得活性表达,并能将酶蛋白分泌到胞外.重组菌株BL21 PGEX 4T-1-Npu具有较好的遗传稳定性,连续传代培养10代,菌株所产酶总酶活性仍保持在715 U;纯化后的酶液于25℃保存6个月酶活性仍保持在5427 U,于4℃保存12个月酶活性仍保持在5390.5 U.这是首次对来源于类芽孢杆菌属(paenibacillus)的普鲁兰酶进行报道,由于Npu具有较好的水解淀粉支链的能力,因此其在淀粉加工业以及洗涤业上应用前景良好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁宁	甘肃省商业科技研究所有限公司	33	146	6.0	10.0
2	胡先望		25	130	5.0	10.0
4	李素岳		11	14	3.0	3.0
5	张鸣明		13	21	3.0	4.0
6	张春园		5	0	0.0	0.0
9	何海宁		8	1	1.0	1.0