多重位点特异性PCR快速检测牛肉中常见掺假动物源性成分

• 作者: 冯源 孙丽媛 张丽华 李明成 李盈诺 王艳双 艾金霞 苑广信
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: mtDNA cytb基因 SNP位点 牛肉 多重PCR 肉类掺假 动物源性成分
• 年，卷（期）: 2019,（24）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 82-87
• 页数: 6页
• 分类号: TS251.5+2
• 字数: 5686字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.24.014

摘要

目的:基于动物线粒体cytb基因的多态性位点,建立一种特异性多重PCR体系检测牛肉、猪肉和鸡肉的方法.方法:提取肉类的基因组DNA,利用不同物种mtDNA cytb基因序列的SNP位点的差异,设计特异性引物.进行多重PCR扩增,利用扩增产物片段大小不同,检测牛肉中常见的掺假动物源性成分.通过灵敏性试验,确定最低检测量.结果:实验设计的引物特异性良好,在同一反应体系中,在同一退火温度52℃条件下,牛肉DNA扩增后产生149 bp的特异性条带,猪肉DNA扩增片段为261 bp,鸡肉DNA扩增片段为554 bp,未发生非特异性扩增.且检测的最低浓度达到100 pg/μL,具有高度的灵敏性和适用性.结论:根据动物线粒体cytb基因的差异性位点,开发的多重PCR体系,可一次性地同时检测牛肉、猪肉和鸡肉,可快速、灵敏、高通量地分析食品中掺假动物成分的来源.