环介导等温扩增技术在鸭源成分检测中的研究

• 作者: 吕贝贝 吴潇 唐雪明 武国干 潘爱虎 王荣谈 王金斌 白蓝 蒋玮
• 来源期刊: 食品与生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 牛、羊肉制品 等温扩增技术 环介导等温扩增技术 可视化检测
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 126-133
• 页数: 8页
• 分类号: Q81
• 字数: 4288字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2019.08.018

摘要

为了建立肉产品中鸭源成分的现场快速检测技术,根据动物种间特异性的原则,筛选出一对品种特异的PCR引物,在此引物扩增片段的基础上,设计了环介导等温扩增(LAMP)引物序列,能特异检测鸭源成分.通过条件优化实验,发现在25 μL的扩增体系中,内外引物浓度比为1∶4,温度为63.5℃,MgSO4添加量为5 mM/μ,L,dNTPs添加量为1.75 mM/μL,Bst DNA聚合酶添加量为0.4 U/μL,甜菜碱添加量为0.25μmol/μL,LAMP反应时间为30 min时,LAMP检测体系检测效果达到最优,鸭肉DNA的检测灵敏度可达到10 pg/μL.对牛羊肉中鸭源成分比例的检测灵敏度为0.000 1％.应用该方法对上海市闵行区市场中的牛羊肉产品进行抽样检测,结果从21份样品中成功检测出5份含鸭源成分的混合肉.本研究建立的LAMP检测方法灵敏、快捷,可以实现鸭源成分的现场速测,为肉制品市场的监管提供了一种新方法.