枯草杆菌芽孢皮层裂解酶的分离纯化以及酶学结构分析

• 作者: 孙静 曾朝玮 章中 郭家俊 郭洪伟 马慧娇
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 枯草芽孢杆菌 芽孢 皮层裂解酶 分离纯化 二级结构
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 160-165,223
• 页数: 7页
• 分类号: TS201.3
• 字数: 6272字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.09.028

摘要

本文采用硫酸铵分级沉淀、离子交换层析和凝胶过滤的方法对皮层裂解酶粗酶液进行分离纯化.结果 表明:当硫酸铵的饱和度为60％时,大部分皮层裂解酶被聚集沉淀下来,总蛋白及皮层裂解酶活力较高,酶的比活力为158.22 U/mg,回收率为84.17％,进一步经SP-sephadex C-25离子交换层析法纯化后该酶的比活力为218.31 U/mg,回收率为68.43％,最后使用Superdex 75凝胶过滤进行分离纯化,得到了电泳纯的皮层裂解酶,并且酶的比活力为1690.75 U/mg,回收率为19.45％.纯度为粗酶液的14.98倍,纯化出的皮层裂解酶分子量为61.1 kDa.运用傅里叶光谱(FTIR)对枯草杆菌芽孢皮层裂解酶酶学结构分析,枯草杆菌皮层裂解酶在3415、1665、1080、528 cm-1波数处均有吸收峰,其中在1665 cm-处有明显的酰胺Ⅰ带,应用二阶导数和曲线拟合的方法研究枯草杆菌芽孢皮层裂解酶的二级结构,发现枯草杆菌皮层裂解酶中含12.80％的α-螺旋、31.56％的β-折叠、44.97％的β-转角、以及10.68％的无规卷曲.本文为研究HPTS杀灭芽孢的机理提供了实验材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	章中	宁夏大学农学院	41	198	8.0	13.0
2	郭家俊	宁夏大学农学院	7	4	1.0	1.0
3	孙静	宁夏大学农学院	8	16	2.0	4.0
4	郭洪伟	宁夏大学农学院	6	6	2.0	2.0
5	马慧娇	宁夏大学农学院	4	3	1.0	1.0
6	曾朝玮	宁夏大学农学院	5	4	1.0	1.0