高粱抗病基因SbSGT1的克隆及原核表达

• 作者: 任明见 屈志广 方远鹏 王营锴 蒋君梅 谢鑫 陈俊 陈美晴
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: 高粱 SGT1 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 1933-1942
• 页数: 10页
• 字数: 6665字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2020.09.1933

摘要

为探究高粱抗病基因SbSGT1的功能,以高粱BTx623为材料,利用RNA反转录得cDNA,以cDNA为模板扩增出全长SbSGT1基因,并对其进行生物信息学分析.进一步构建pET-28a-SbSGT1重组质粒进行原核表达,并分别对表达菌株、诱导温度以及异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导浓度进行了优化.结果 表明,SbSGT1全长1 095 bp,编码364个氨基酸,蛋白理论分子大小约为40.45kDa,蛋白质等电点为5.0.进化树分析表明,SbSGT1与玉米和水稻的亲缘性较高;蛋白质序列分析表明,SbSGT1蛋白为亲水性蛋白,定位在细胞质中;二级结构预测发现其α螺旋和无规则卷曲占比最高,分别达到43.41％和45.88％.原核表达结果表明,SbSGT1最佳表达菌株为大肠杆菌BL21(DE3),最佳诱导温度和IPTG浓度分别为25℃和0.8 mmol· L-1.本研究为进一步探究SbSGT1基因在高粱抗病机理中所发挥的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈俊	贵州大学农学院	31	74	4.0	7.0
2	任明见	贵州大学农学院	80	520	13.0	19.0
4	蒋君梅	贵州大学农学院	10	1	1.0	1.0
7	屈志广	贵州大学农学院	2	0	0.0	0.0
8	方远鹏	贵州大学农学院	6	0	0.0	0.0
9	陈美晴	贵州大学农学院	4	0	0.0	0.0
10	王营锴	贵州大学农学院	1	0	0.0	0.0