非洲猪瘟病毒H240R蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 李佳佳 东梦珂 郑南南 吴宏举 张昂克 张改平 万博 杜永坤
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 关键词: 非洲猪瘟病毒 H240R蛋白 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 简报|Short communications
• 页码范围: 101-106
• 页数: 6页
• 分类号: S852.651
• 语种: 中文

摘要

非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的急性、高热、严重出血、致死率极高的动物传染病,给我国养殖业造成严重的经济损失.本研究将非洲猪瘟病毒H240R基因克隆至pET-28a(+)载体中,成功构建了pET-28a(+)-H240R原核表达载体,将重组载体转化入BL21感受态细胞,用IPTG诱导表达.SDS-PAGE和Western blot鉴定结果表明,成功获得了H240R重组蛋白,将其纯化后作为抗原免疫新西兰大白兔,分离血清并分析其反应特异性.ELISA检测结果显示,血清抗体效价达到1∶256 000.Western blot和间接免疫荧光(IFA)鉴定结果表明,制备的兔源多克隆抗体能够同时与原核和真核表达的H240R蛋白反应.本研究成功制备针对ASFVH240R蛋白的多克隆抗体,该多克隆抗体具有良好的反应活性及特异性,为建立针对ASFV抗原、抗体的免疫学检测方法提供了新的思路.