非洲猪瘟病毒pNP419L蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

• 作者: 吕欣倩 牛庆丽 樊洁 杨吉飞 赵亚茹 张忠辉 杨赛霞 敬梦瑶 耿抒贤 关贵全 刘志杰 殷宏
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 非洲猪瘟病毒 NP419L基因 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2021,（11）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1392-1397
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0205

摘要

为了评估原核表达的非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)pNP419L蛋白的免疫原性及其潜在的应用价值,将PCR扩增的NP419L基因片段插入载体pET-28a中,然后转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行表达,以金属离子层析法纯化蛋白后,免疫新西兰大白兔制备家兔抗pNP419L多克隆抗体.结果 显示,用PCR成功地扩增了NP419L基因序列,NP419L基因转入表达载体后被成功表达;纯化后的重组pNP419L蛋白的分子质量为42 ku;用间接ELISA检测家兔源多克隆抗体的效价达到1∶512000,IFA试验及Western-blot检测表明该多克隆抗体具有良好的反应性及特异性.本研究为pNP419L蛋白生物学功能的研究奠定了基础.