非变性牦牛骨胶原蛋白的提取与表征

• 作者: 么林妍 凌碧扬 刘晓乐 刘茵 肖建喜
• 来源期刊: 皮革科学与工程
• 学科: 工学
• 关键词: 牦牛骨胶原蛋白 三股螺旋结构 变性胶原蛋白 靶向探针
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 9-14
• 页数: 6页
• 分类号: TS512
• 语种: 中文
• DOI: 10.19677/j.issn.1004-7964.2022.01.002

摘要

三股螺旋结构是胶原蛋白的关键结构特征,胶原蛋白变性会破坏三股螺旋结构进而严重影响其生物功能.牦牛是高寒地区特有的半野生牛种,主要生活在我国的青藏高原.我们开发了一种温和的生物工艺,从牦牛骨中提取制备了高品质的牦牛胶原蛋白(Yakossein,YO).聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和圆二色谱(CD)结果表明,我们提取得到的为Ⅰ型牦牛胶原蛋白,未发生降解,并且整体保持完整的三股螺旋结构.酶切实验进一步表明,提取的YO未发生变性,它可以有效抵抗胃蛋白酶的降解.同时,我们建立变性胶原蛋白的靶向结合实验,利用高特异性的荧光多肽探针来检测牦牛胶原蛋白的变性程度.该靶向探针对提取的YO完全没有结合能力,表明该YO为非变性胶原蛋白.细胞实验表明,YO对成纤维细胞有良好的粘附能力,并且可以显著促进其细胞增殖.