辣木籽凝乳酶的提取分离条件优化

• 作者: 吴改转 庄玺 王雪峰 黄艾祥
• 来源期刊: 中国油脂
• 关键词: 辣木籽 凝乳酶 硫酸铵分级沉淀 离子交换色谱法 凝乳活性 SDS-PAGE
• 年，卷（期）: 2024,（7）
• 所属期刊栏目: 综合利用
• 页码范围: 146-151
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.19902/j.cnki.zgyz.1003-7969.220277

摘要

为给辣木籽凝乳酶的开发利用提供理论依据，以脱脂辣木籽粉为原料，采用盐法提取、硫酸铵(AS)分级沉淀和离子交换色谱法提取分离凝乳酶。通过单因素试验和正交试验对辣木籽凝乳酶的盐法提取条件进行优化，采用单因素试验对离子交换色谱法分离纯化条件进行优化，并采用SDS-PAGE和RP-HPLC对分离得到的辣木籽凝乳酶的分子质量和纯度进行分析。结果表明：盐法提取的最佳条件为料液比1∶10、提取温度30℃、pH 7.15、NaCl浓度0.3 mol/L、提取时间0.5 h;在20%～40%AS饱和度下的沉淀蛋白凝乳活性最好且蛋白质总占有率达61.71%;离子交换色谱法的最佳分离条件为进样质量浓度30 mg/mL、流动相pH 5.15、流速1.68 mL/min、流动相组成为0.05 mol/L醋酸钠+0.05 mol/L氯化钠，在此条件下辣木籽凝乳酶的凝乳比活力值达到24 SU/mg;该凝乳酶的分子质量主要分布在35～45 kDa,纯度达到90%以上。采用该方法能有效提取分离辣木籽凝乳酶，且能很好地保持其凝乳活性。