转糖基β-半乳糖苷酶产生菌筛选和鉴定及酶催化生成低聚半乳糖

• 作者: 李正义 李玉梅 王红妹 肖敏 钱新民
• 来源期刊: 山东大学学报（理学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 巨大芽孢杆菌 16S rDNA β-半乳糖苷酶 转糖基作用 低聚半乳糖
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 页码范围: 133-139
• 页数: 7页
• 分类号: Q93
• 字数: 5564字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-9352.2006.01.026

摘要

通过水解活性和转糖基活性筛选,从实验室97株保存菌种中获得1株具有转糖基活性的β-半乳糖苷酶产生菌,克隆并序列分析了该菌株16SrDNA基因片断,GenBank收录号为DQ267829.综合其形态学特征、生理生化特征及16SrDNA序列同源性分析结果,将其鉴定为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)2-37-4-1.确定了该菌株β-半乳糖苷酶产酶培养基的碳源为乳糖1%,氮源为蛋白胨0.5%和酵母膏0.5%,培养条件为37℃摇床培养18 h;碳源实验证明,该菌株β-半乳糖苷酶产生为乳糖诱导型.利用薄层层析技术研究了pH值、乳糖底物浓度、反应温度和反应时间对该菌株β-半乳糖苷酶以乳糖为底物转糖基合成低聚半乳糖的影响,确定最适反应条件为pH7.5、50mmol/L(磷酸缓冲液)配制的40%乳糖溶液,55℃反应24h.转糖基反应产物高压液相色谱分析其组成为低聚半乳糖25.68%,双糖(包括乳糖和转移二糖)33.02%,葡萄糖26.37%和半乳糖14.92%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖敏	山东大学微生物技术国家重点实验室	35	433	13.0	19.0
2	钱新民	山东大学微生物技术国家重点实验室	17	379	9.0	17.0
3	李玉梅	山东大学微生物技术国家重点实验室	11	48	3.0	6.0
4	王红妹	山东大学微生物技术国家重点实验室	18	73	4.0	8.0
6	李正义	山东大学微生物技术国家重点实验室	11	77	4.0	8.0