ING4的原核表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 杨吉成 王金志 盛伟华 缪竞诚 谢宇锋
• 来源期刊: 苏州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 原核表达 抗体 ING4
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 930-932,935
• 页数: 4页
• 分类号: R34
• 字数: 2784字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-0399.2006.06.006

摘要

目的 在原核系统中表达并纯化ING4蛋白,制备多克隆抗体.方法 构建表达载体pET-21a(+)-ING4,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳检测.结果 构建的表达载体pET-21a(+)-hGDNF经酶切、PCR鉴定均出现750 bp左右的条带,测序结果正确,用IPTG诱导转化菌有30KD大小的目的 条带,表达的目的蛋白占菌体总蛋白10%以上,以包涵体形式存在,纯化后其纯度可达70%以上.用纯化的ING4蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体.结论 制备的多克隆抗体为下阶段的研究提供了重要的实验材料.