慢病毒RNAi载体的制备及滴度测定方法的建立

• 作者: 宋波 杨靖 王茜 许予明 赵国强 韩志强
• 来源期刊: 中原医刊
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒载体 RNA干扰 滴度测定 嘌呤霉素
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 32-33
• 页数: 2页
• 分类号: R4
• 字数: 3188字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-4756.2007.10.014

摘要

目的 构建可用于神经系统基因功能研究和基因治疗的慢病毒RNAi载体系统,并建立一种方便、快捷的慢病毒滴度测定方法 .方法 三质粒系统:PLK0.1-puro、△8.2、水疱性口炎病毒G糖蛋白(VSV-C)共转染293T细胞,产生慢病毒RNAi载体颗粒,超速冷冻离心浓缩;将病毒颗粒进行系列稀释后感染Eca9706细胞,采用嘌呤霉素最小致死量筛选病毒感染细胞的方法 ,进行慢病毒滴度测定.结果 完成了慢病毒RNAi载体的包装及浓缩,确定了嘌呤霉素对Eca9706细胞的最小致死浓度为2.7 μg/ml,并应用该浓度测得病毒颗粒的滴度为107TU/ml.结论 成功构建了一种慢病毒RNAi载体,并建立了一种可行的慢病毒滴度测定方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵国强		245	807	11.0	16.0
2	许予明		209	955	14.0	21.0
3	宋波		88	465	11.0	18.0
4	韩志强		14	14	2.0	3.0
5	王茜		39	64	4.0	6.0
6	杨靖		17	40	4.0	6.0