鼠抑铁素2蛋白的原核表达及鉴定

• 作者: ZHU Dao-yin 帖儒修 李娜 王爽 王瑜伟
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 抑铁素2 基因克隆 原核表达 生物学活性
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 679-682
• 页数: 4页
• 分类号: Q7S6
• 字数: 3214字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2008.08.011

摘要

目的 表达鼠抑铁素2(1cn2)蛋白,并检测表达产物的生物学活性.方法 从小鼠RAW264.7巨噬细胞提取总RNA,逆转录合成cDNA,以cDNA为模板,PCR扩增lcn2基因片段,插入原核表达质粒pET-32a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS,用IPTG诱导表达.表达产物经His-tag in-gel stain鉴定后.采用Ni2+-NTA亲和层析纯化,并检测其生物学活性.结果 经核苷酸序列测定和酶切鉴定,表明重组质粒pET-32a(+)-lcn2构建正确.表达的重组蛋白经SDS-PAGE分析,相对分子质量约为21 000,表达量占菌体总蛋白的35%,主要以包涵体形式存在.纯化后蛋白浓度为1.0 g/L,并对大肠杆菌和乙型链球菌生长有一定的抑制作用.结论 成功地在原核细胞中表达了重组lcn2蛋白,且表达的蛋白具有一定的抑菌作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李娜	重庆医科大学免疫学教研室	63	261	9.0	11.0
2	帖儒修	重庆医科大学免疫学教研室	8	14	2.0	3.0
3	王瑜伟	重庆医科大学免疫学教研室	15	21	3.0	3.0
4	王爽	重庆医科大学免疫学教研室	23	83	5.0	8.0
5	ZHU Dao-yin	重庆医科大学免疫学教研室	1	2	1.0	1.0